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诊断与治疗
支原体肺炎的诊断与治疗
编辑:admin 2014-11-14 14:42
三、支原体肺炎的诊断与治疗
3.1 血清学基础
MP-IgM+MP-IgG具有诊断急性感染和慢感染或既往
有过感染的作用,对无症状的健康或亚健康的带
菌者在传播MP上具有重要的诊断价值。
3.2 临床检测方法
3.2.1支原体分离培养—平板培养
营养要求比一般细菌高,除基础营养物质外还需加入10%-20%人或动物血清以提供支原体所需的胆固醇。
生长缓慢,在琼脂含量较少的固体培养基上孵育2~3天出现典型的“荷包蛋样”菌落:圆形(直径10~16um),核心部分较厚,向下长入培养 基,周边为一层薄的透明颗粒区。
3.2.2支原体分离培养—培养试剂盒
传统肺炎支原体培养是诊断的金标准,但其对营养要求比较苛刻,培养难度大,耗时长,临床很少使用
商业化的培养试剂盒基于肺炎支原体生长过程中分解葡萄糖产酸,使酸碱指示剂发生颜色变化而判读结果,48-72h
多采用抑菌剂抑制其他细菌生长来保证其特异性,当样本中有分解葡萄糖的非目的菌对培养基中抑菌剂无效时可能造成假阳性结果
3.2.3咽拭子超高倍镜检
------取患者咽拭子标本直接在超高倍显微镜下镜检,
根据上皮细胞有支原体包囊附着或游离的支原体包囊(内含不停泳动的支原体)或白细胞或吞噬细胞内有非常活跃的、不停泳动的、形态上呈高度的多形性(球形、杆形、丝状、分枝状等),或者白细胞、吞噬细胞内吞噬数量不等、不能消化、大小不一、活动踊跃的支原体即可判断为支原体阳性。该方法不确定性太强,特异性较差。
3.2.4 冷凝集试验(CAT)
------冷凝集试验(CAT)是根据支原体患者血清中有一种抗红细胞I抗原的抗体称红细胞凝集素,能与自身或“0”型人的红细胞在 0℃一4℃条件下发生凝集反应,37℃时已凝集的红细胞呈可逆性完全分开。但MP轻症阳性率只有30%左右,且50%左右正常人血清中有冷凝集素,只是小于1:10,有时大叶性肺炎也成阳性反应, 尤其是当患者有下列疾病时,冷凝集试验亦有较高效价的阳性反应:流行性感冒、传染性单核细胞增多症 等。因CAT特异度和敏感度均为最低,因此其临床诊断价值不大。
3.2.5 间接红细胞凝集反应(IHA)
------一般用绵羊红细胞以单宁酸处理,再以MP抗原使之结合,如加上抗体则可见红细胞凝集反 应。统计学处理表明间接血凝试验在临床应用中 仍具有较高使用价值。灵敏度、误诊率较高,而特异度、漏诊率较低,且价格低廉,适合于发 现病例。
3.2.6 明胶颗粒凝集试验(PLA,日本富士)
富士明胶颗粒凝集法(PLA)是将肺炎支原体(株)细胞膜成分致敏人工明胶颗粒,致敏粒子在与人血清中存在的肺炎支原体抗体发生凝集反 应,可定量。操作简单、迅速,并尽可能消除红细胞载体引起的非特异性凝集,凝集图像清晰,血清MP抗体滴度值与病情严重程度吻合。PLA试 验只检 测总抗体滴度而无法区分IgG与IgM,其所测得的抗体80%~90%为MP-IgM,10%~20%左右的MP-IgG。抗体滴度受IgG的影响较大,升高时 间偏晚,高 滴度抗体持续的时间较长,客观上容易导致过度治疗。
3.2.7酶联免疫试验(ELISA)
------ELISA是将抗原吸附在固相载体上,加待测抗体之后再加相应酶标抗体,生成抗原-待测抗体-酶标记抗体的复合物,再与该酶的底物反 应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体的量。待测抗体的定量与有色产生成正比。敏感性高,特异性强。
3.2.8 核酸扩增技术(NAATs)-环介导等温扩增(LAMP)
-----一种新式核酸扩增技术,它依靠一种具有链置换活性的DNA聚合酶和2对特殊设计的引物,不需要反复的温度循环和昂贵的仪器设备,在等 温条件下即可高效快速地完成扩增反应。反应结束后,对结果进行判定常用琼脂糖凝胶电泳检测、浊度检测、荧光比色检测和荧光实时定量检 测。特异性强,灵敏度高,反应时间短,但是需要购置昂贵的荧光定量PCR仪或浊度仪,对引物要求高,由在线软件设计的引物有上千条,要 筛选出合适的引物需要耗费大量的工作。容易形成污染。
3.2.9基因芯片、蛋白芯片
------可同时检测多种病原体。
3.2.10胶体金法
包括胶体金免疫渗滤和胶体金免疫层析。
3.3 诊断的血清学意义
3.4 治疗
MP无细胞壁,故作用于微生物细胞壁的抗生素对其无效,应选择能干扰和抑制微生物蛋白质合成的药物,如作用于核糖体的大环内酯类、四环素 类和干扰蛋白质合成的喹诺酮类。喹诺酮类对骨骼发育可能产生不良影响,应避免用于18岁以下未成年人。四环素类引起牙齿黄染及牙釉质发育 不良,不可用于8岁以下患儿。由此,大环内酯类是小儿MP感染的首先抗生素,包括红霉素、罗红霉素、克拉霉素、阿奇霉素。
MP是细胞外寄生菌,首先选用细胞外药物浓度高的红霉素,如果因为红霉素的胃肠道反应大,可改用阿奇霉素、罗红霉素、克拉霉素、泰利霉素 中之一种(单用任何一种,其疗程约4周)。